Hosszabb diplomáciai előkészületek után a spanyol Tordesillas városban konferenciára került sor a két nagyhatalom, Spanyolország és Portugália között. A tárgyalások a már felfedezett és ezután felfedezendő világ érdekszférákra való felosztásáról folytak. A szerződés, amelyet a konferencia végeztével mindkét gyarmati hatalom aláírt, a következő szabályozásokat tervezte: - A világot két részre osztják; a demarkációs vonal északról délre húzódik az Azori-szigetektől mintegy 370 mérföldnyire; - Spanyolország kapja az ettől a határtól nyugatra fekvő, Portugália a keletre fekvő területeket; - Azok a felfedezések, melyeket bármely fél a másik területén tesz, a világnak azon a részén uralkodó mindenkori gyarmati hatalmat illetik meg; - Ezen szerződés érvénybelépésének határideje a szerződés évének, azaz 1494. júliusának 20. napja. A szárazföld és a tengerek felosztása után maradt még a demarkációs vonalak bemérése, amit rendezni kellett. Mindkét fél megegyezett egy tízhónapos határidőben, melyen belül a szerződést kötött uraknak kettő vagy négy evezőshajót kell küldeniük, hogy a fentnevezett vonalat közösen meghúzzák. Továbbá megegyeztek abban, hogy Spanyolországnak szabad átutazási joga van a Portugália befolyása alatt álló területeken, hogy így az Azori-szigetektől nyugatra eső saját területeire eljuthasson. VI. Sándor pápa 1493-ban született javaslatához képest a demarkációs vonal egyértelműen nyugatra tolódott, ami Portugáliát juttatta előnyökhöz. A tordesillasi szerződés létrejöttében a pápának is fontos szerepe volt. A Borgiák híres spanyol nemesi nemzetségéből származó VI. Sándor már egy évvel azelőtt az "Inter caetera divinae" bullában kölcsönös megállapodást indítványozott Spanyolország és Portugália között, hogy a gyarmatpolitikai konfliktusokat elkerüljék. Az ugyanebben az évben létrejött rendelet, a "Dudum siquidem" kiegészítette a pápai indítványt. Mindkét esetben Spanyolországból származó javaslatok képezték a szöveg alapját. Portugál részről azt gyanították, hogy a Borgia-pápa spanyol hazájának akar kedvezni.