Miután II. Ulászló várva várt fiúgyermeke 1506 júliusában megszületett, 1515-ben újra megerősítették az 1506. március 20-án kötött Habsburg-Jagelló házassági szerződést. A kettős, Jagelló-Habsburg-eljegyzést 1515. július 22-én tartották meg Bécsben. Mária és Lajos hivatalos esküvőjét 1520. decemberében képviselők útján rendezték meg Innsbruckban. Miután 1521-ben Lajos nagykorúvá vált, Mária Magyarországra érkezett, s 1522. január 13-án a pár ténylegesen egybekelt. A határozott Mária jelenléte csakhamar éreztette hatását II. Lajosnak a cseh és magyar rendekkel szembeni politikájában.